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clodronateliposomes脂質(zhì)體使用說明書

更新時(shí)間:2019-10-25      點(diǎn)擊次數(shù):5959

clodronateliposomes脂質(zhì)體使用說明書

 

產(chǎn)品描述

磷脂雙層由磷脂酰膽堿和膽固醇組成。將所有脂質(zhì)體制劑懸浮在無菌磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中:

– 10 mM的Na2HPO4;
– 10毫米NaH2PO4;
– 140毫米氯化鈉。

我們所有的脂質(zhì)體均帶負(fù)電荷,因此不會一起阻塞。懸浮液中的脂質(zhì)體沒有大小,這意味著它也包含越來越大的脂質(zhì)體(大3微米)。平均而言,脂質(zhì)體的大小為1.7微米。

氯膦酸鹽脂質(zhì)體:人工制備的脂質(zhì)囊泡的懸浮液,包裹了氯膦酸鹽。懸浮液中氯膦酸鹽的濃度約為。5毫克/毫升 氯膦酸鹽以CH2Na2Cl2O6P2·5 H2O的形式封裝在脂質(zhì)體囊泡中。

PBS脂質(zhì)體:人工制備的脂質(zhì)囊泡的懸浮液,其中包裹了PBS水溶液。這些不含氯膦酸鹽,可用于對照實(shí)驗(yàn)。

熒光DiI脂質(zhì)體:人工制備的脂質(zhì)囊泡的懸浮液,其中包封了PBS水溶液,并用熒光染料DiI標(biāo)記。它們不含氯膦酸鹽,可用于研究通過特定給藥途徑注射的脂質(zhì)體是否能夠到達(dá)要研究的巨噬細(xì)胞。

 

儲存和使用說明

到達(dá)脂質(zhì)體后,應(yīng)將其儲存在4 – 8ºC(或39 – 47ºF)之間。脂質(zhì)體懸浮液不得冷凍,也不要暴露于高溫下。這可能會對磷脂雙層造成干擾,可能導(dǎo)致氯膦酸鹽從脂質(zhì)體中泄漏出來。

給藥前,首先使脂質(zhì)體達(dá)到室溫,然后輕輕搖動(dòng)或攪拌懸浮液。一段時(shí)間后,脂質(zhì)體易于沉淀,導(dǎo)致小瓶中的分布不均勻。當(dāng)注射花費(fèi)太多時(shí)間時(shí),脂質(zhì)體甚至可能在注射器中沉淀。如果使用同一注射器注射多只動(dòng)物,可能會導(dǎo)致劑量不同。

不建議稀釋懸浮液,但如有必要,請使用PBS或鹽水。

我們建議客戶在發(fā)貨后16周內(nèi)使用脂質(zhì)體制劑。強(qiáng)烈建議不要在到期日期之后使用。在此期間之后,污染的風(fēng)險(xiǎn)會增加,并且可能會發(fā)生輕微的功能喪失。

作用機(jī)理

巨噬細(xì)胞在免疫和非免疫防御機(jī)制中起重要作用。它們是抵御滲透到脊椎動(dòng)物體內(nèi)的細(xì)菌,病毒和其他形式的微生物污染的首道防線。巨噬細(xì)胞是大型細(xì)胞,幾乎存在于所有身體組織中,它們可以具有不同的形式和名稱(例如庫普弗細(xì)胞,肺泡巨噬細(xì)胞,小膠質(zhì)細(xì)胞,破骨細(xì)胞,紅髓巨噬細(xì)胞)。巨噬細(xì)胞“清除”,它們攝入并消化可能是潛在病原體的所有異物,微生物,癌細(xì)胞和細(xì)胞碎片。該過程稱為吞噬作用。巨噬細(xì)胞主要通過可溶性分子如細(xì)胞因子和趨化因子的介導(dǎo)來進(jìn)一步調(diào)節(jié)許多非吞噬細(xì)胞的功能。他們參與先天免疫,

脂質(zhì)體是人工制備的球體,由同心磷脂雙層組成。當(dāng)磷脂分散在水中時(shí),親水性頭部將構(gòu)成脂質(zhì)體的兩個(gè)外部部分,而疏水性脂肪酸基團(tuán)將構(gòu)成內(nèi)部部分(見圖1)。水室分隔雙層,親水分子可以溶解在其中,形成脂質(zhì)體包封的分子。氯膦酸鹽(二氯亞甲基雙膦酸酯或Cl2MBP)是一種親水性分子,可以封裝在磷脂雙層中。游離氯膦酸鹽不易穿過細(xì)胞膜,并通過腎臟系統(tǒng)從循環(huán)中迅速清除(即數(shù)分鐘內(nèi))。但是,氯膦酸鹽脂質(zhì)體包埋在脂質(zhì)體中時(shí),會被巨噬細(xì)胞吞噬,無法逃脫(見圖2)。磷脂雙層被溶酶體磷脂酶消化,而氯膦酸鹽未被消化并且保留在巨噬細(xì)胞中。巨噬細(xì)胞攝入的磷脂雙層和脂質(zhì)體越多,在巨噬細(xì)胞內(nèi)積累的氯膦酸鹽越多。超過一定的細(xì)胞內(nèi)濃度,氯膦酸鹽將通過啟動(dòng)程序性細(xì)胞死亡(即凋亡)來消除巨噬細(xì)胞。

機(jī)制氯膦酸鹽脂質(zhì)體

圖1.氯膦酸鹽脂質(zhì)體的示意圖。囊泡由同心的磷脂雙層構(gòu)成,被水性隔室隔開。雙層由親水和疏水基團(tuán)組成。將氯膦酸鹽(在此以黑色方塊表示)溶解在水溶液中并封裝在脂質(zhì)體內(nèi)。

 

氯膦酸鹽脂質(zhì)體通過巨噬細(xì)胞攝取和消化的示意圖。

圖2.巨噬細(xì)胞對氯膦酸鹽脂質(zhì)體的攝取和消化示意圖。巨噬細(xì)胞通過胞吞作用攝入氯膦酸鹽脂質(zhì)體,然后與含有磷脂酶的溶酶體(L)融合(箭頭)。磷脂酶破壞的磷脂雙層越多,在巨噬細(xì)胞內(nèi)釋放的氯膦酸鹽(黑色方塊)越多。巨噬細(xì)胞終通過凋亡被殺死。(N =巨噬細(xì)胞核)。

 
因此,氯膦酸鹽脂質(zhì)體可用于通過消耗巨噬細(xì)胞來研究巨噬細(xì)胞功能。例如,它們可以應(yīng)用于各種自身免疫性疾病,移植,神經(jīng)系統(tǒng)疾病和基因治療的模型。氯膦酸鹽脂質(zhì)體只有在可以達(dá)到的情況下才能耗盡巨噬細(xì)胞。一些組織可以形成脂質(zhì)體的屏障。通過選擇氯膦酸鹽脂質(zhì)體的正確給藥途徑,可以耗盡特定的器官或組織的巨噬細(xì)胞。有關(guān)管理協(xié)議的更多信息,請單擊此處。

PBS脂質(zhì)體主要用于對照實(shí)驗(yàn)。但是,這些也可以在某些時(shí)間段內(nèi)通過飽和來阻止吞噬作用。因此,PBS脂質(zhì)體不能代表正常健康的,未阻斷的,未抑制的和未活化的巨噬細(xì)胞的對照實(shí)驗(yàn)。當(dāng)比較氯膦酸鹽脂質(zhì)體和PBS脂質(zhì)體的作用時(shí),其作用因此可能小于預(yù)期。

有關(guān)更多信息,請參見:

– Van Rooijen,N.和Sanders,A.(1994)。脂質(zhì)體介導(dǎo)的巨噬細(xì)胞耗竭:作用機(jī)理,脂質(zhì)體制備和應(yīng)用。免疫學(xué)雜志,174(1-2),83-93。
– Van Rooijen,N.,Sanders,A.和van den Berg,TK(1996)。脂質(zhì)體介導(dǎo)的氯膦酸鹽和丙am的細(xì)胞內(nèi)遞送誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞凋亡。免疫學(xué)雜志,193(1),93-99。

 

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