Ludger是一家生物科學(xué)公司，專門研究糖生物學(xué)的醫(yī)學(xué)應(yīng)用分析技術(shù)。該技術(shù)起源于英國(guó)牛津大學(xué)。它在范圍內(nèi)用于FDA和EMEA批準(zhǔn)的生物藥品的質(zhì)量控制中，并可用于支持IND提交。我們從1999年開始運(yùn)營(yíng)，已建立了一個(gè)客戶群，包括的制藥和生物技術(shù)公司。

上海起發(fā)現(xiàn)貨ludger LS-UR2-2.1x100說明書

UR2 2.1x100mm UHPLC色譜柱

LudgerSep uR2 2.1x100mm色譜柱已經(jīng)開發(fā)出來(lái)，可使用LudgerTag DMB唾液酸標(biāo)記試劑盒對(duì)用DMB標(biāo)記的唾液酸進(jìn)行UHPLC分析。

尺寸：2.1mm x 100mm

Part Number: LS-UR2-2.1×100

LudgerSep uR2 2.1x100mm UHPLC色譜柱已經(jīng)開發(fā)出來(lái)，可使用LudgerTag DMB唾液酸標(biāo)記試劑盒分析用DMB標(biāo)記的唾液酸（1,2-二氨基-4,5亞甲二氧基苯.2HCl）。

LudgerSep uR2色譜柱設(shè)計(jì)用于新一代的UHPLC儀器，能夠承受高流動(dòng)壓力和快速的樣品分析。為了利用低于3μm粒徑的色譜柱的高分離能力，我們建議將進(jìn)樣量保持在5μL或以下，并大程度地減少系統(tǒng)空隙體積。理想情況下使用全循環(huán)注入。油管應(yīng)為窄孔（直徑約0.13 mm或更小），檢測(cè)器流通池體積應(yīng)為10μl或更小。盡管產(chǎn)品指南中顯示了示例色譜圖，但保留時(shí)間將根據(jù)所用的UHPLC系統(tǒng)而有所不同。

程序概述

唾液酸
的釋放糖蛋白中唾液酸的釋放是通過溫和的酸水解而發(fā)生的。將樣品和對(duì)照與2M乙酸在80°C下孵育2小時(shí)。

唾液酸標(biāo)記反應(yīng)
用1,2-二氨基-4,5-亞甲基二氧基苯-2HCl（DMB）對(duì)釋放的二氧化硅進(jìn)行熒光標(biāo)記。酸水解的樣品和過程控制以及Ludger唾液酸標(biāo)準(zhǔn)品：Neu5Ac，Neu5Gc，唾液酸參考板和Neu5,9Ac2（如果使用）與DMB在50°C孵育3小時(shí)。

通過HPLC或UHPLC分析
使用Neu5Ac和Neu5Gc標(biāo)準(zhǔn)物計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線。唾液酸參考板和Neu5,9Ac2用于鑒定唾液酸。可以使用適用于HPLC 的LudgerSep R1x150mm色譜柱或使用LudgerSep uR2x100mm色譜柱的UHPLC進(jìn)行分析。

DMB標(biāo)記的唾液酸參考面板在LudgerSep uR2 2.1x100mm UHPLC色譜柱上運(yùn)行。
峰：1 = Neu5Gc；2 = Neu5Ac; 3 = Neu5,7Ac2; 4 = Neu5Gc，9Ac; 5 = Neu5,8Ac2; 6 = Neu5,9Ac2; 7 = Neu5，x，xAc3（其中x是未知的乙酰基位置）；* =試劑

uR2 2.1x100mm UHPLC色譜柱規(guī)格

顆粒： 1.9 µm二氧化硅，十八碳ade涂層衍生。孔徑為175埃。
色譜柱尺寸： 2.1mm x 100mm 
色譜柱體積： 0.34 mls 
典型流速： 0.1 – 0.6 ml / min 
壓力極限： 15,000 psi 
色譜柱管：不銹鋼，與Valco兼容的端接頭
pH兼容性： pH 1至pH 11

Certificate of Analysis

LudgerSepTM UR2 UHPLC Column for Glycan Analysis

Cat. #: LS-UR2-2.1x100

Batch: C04U-06

Size: 2.1 x 100 mm

本欄符合Ludger文件#LS-UR2-指南中給出的規(guī)范。
填充溶劑50%乙腈（aq）
測(cè)試分析
流量500ul/min
50%乙腈（aq）洗脫液
壓力8066 psi
樣品體積1微升
254nm處的紫外檢測(cè)