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proaxsis PA004-1操作指南

更新時間:2021-03-22      點(diǎn)擊次數(shù):2671

proaxsis PA004-1操作指南

NEATstik®(10盒)

PA004-1(單個試劑盒)和PA004-10(10個試劑盒)

NEATstik®是一項(xiàng)快速的即時護(hù)理測試,可以監(jiān)測痰液樣本中活性中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶的水平。

NEATstik®通常以10個測試盒的形式提供。如果需要,可以提供單項(xiàng)測試,費(fèi)用為£28英鎊,另加運(yùn)費(fèi)和增值稅(如果有)

 

  1. 預(yù)期用途

NEATstik®是一種一次性體外診斷試劑,用于定性檢測痰液樣本中的活性中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)。本產(chǎn)品僅供醫(yī)療保健專業(yè)人士使用。

 

  1. 背景

中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)是一種絲氨酸蛋白酶,儲存在中性粒細(xì)胞中直至活化和釋放。NE有三種形式:作為活性酶、無活性酶原或抑制劑結(jié)合酶。活性NE是一種降解酶,在正常生理情況下,參與

在炎癥和消除微生物感染中1。然而,在肺部疾病中,當(dāng)發(fā)現(xiàn)高濃度的活性NE時,這種降解能力引起過度的組織降解,損傷氣道壁有助于破壞性和惡性的炎癥周期2。

痰中的活性NE是感染和炎癥的已確定生物標(biāo)志物,與炎性肺病的感染嚴(yán)重程度相關(guān),包括但不限于囊性纖維化(CF)、慢性阻塞性

肺部疾病(COPD)和支氣管擴(kuò)張癥3-5。持續(xù)監(jiān)測痰液中這種臨床上有用的生物標(biāo)志物可能有助于這些肺部疾病的管理。

  1. 試驗(yàn)原理

NEATstik®利用ProteaseTag®技術(shù)特異性檢測痰液樣本中的活性NE。

NEATstik®由封裝在塑料盒內(nèi)的側(cè)流試紙組成。試紙條由膜和墊組成,置于固體載體上,應(yīng)用結(jié)合物和兩條反應(yīng)線:供試(T)線和對照線

(C)線。結(jié)合物是ProteaseTag®(旨在與活性NE特異性相互作用)和有色金顆粒的混合物。供試(T)細(xì)胞系由可檢測NE的抗體和對照(C)細(xì)胞系可檢測結(jié)合物組成。

樣品稀釋后,向NEATstik®的樣品端口加入小體積,開始檢測過程。稀釋樣本沿試紙移動,并與結(jié)合物相互作用。結(jié)合物中的ProteaseTag®將與樣本中存在的活性NE結(jié)合,沿試紙上行并與供試品結(jié)合

(T)線。過量結(jié)合物將與對照(C)線結(jié)合。

檢測線的外觀確認(rèn)了樣品中存在的活性NE高于預(yù)先設(shè)定的閾值。

質(zhì)控線的外觀證實(shí)檢測正確進(jìn)行。

  1. 試劑盒組分

每個復(fù)合包裝盒包含10個套件。

每個試劑盒包含:

密封箔袋中的1×NEATstik®側(cè)流檢測

1 xNEATstik®樣本稀釋緩沖液(20 mL)1 x痰液稀釋罐

1 x雙球吸管1 x刻度吸管1 x說明書

 

需要但未提供的材料

痰液收集罐稱量秤或天平秒表/計時器

  1. 試驗(yàn)程序

收集樣品

采集樣本進(jìn)行檢測時,要求患者將痰液(不是唾液)咳入痰液采集壺(未提供)。建議立即檢測樣品。

樣品制備

加入NEATstik®前,必須稀釋痰液樣本。

  1. 將痰液稀釋罐的底部放在稱量天平上。稱量天平去皮重(零)。
  1. 將痰液稀釋罐保持在稱量天平上,使用抹刀(連接在痰液稀釋罐的蓋子上)將1-2 g痰液從痰液收集罐中轉(zhuǎn)移到痰液稀釋罐中。
  2. 記錄轉(zhuǎn)移痰液的重量(g)。痰液稀釋罐應(yīng)保持在稱量天平上。
  3. 使用以下計算公式計算NEATstik®樣品稀釋緩沖液產(chǎn)生10倍稀釋所需的量:

痰液重量 = g

x 9

= g NEATstik®

樣品稀釋緩沖液

  1. 稱量天平去皮重(零)。
  2. 使用刻度移液管,將NEATstik®樣本稀釋緩沖液轉(zhuǎn)移至痰液稀釋罐中,直至計算重量。
  3. 將蓋子放在痰液稀釋罐上,并確保其擰緊。
  4. 倒置痰液稀釋槽,使痰液與緩沖液混合

10次。

  1. 檢測方法(續(xù))

執(zhí)行測試

  1. 從鋁箔包裝中取出NEATstik®,置于水平面上,觀察窗朝上。
  2. 取下痰液稀釋罐的蓋子。
  3. 使用雙球吸管吸取稀釋痰液樣本。盡量確保

讀取結(jié)果和質(zhì)量控制

如果檢測成功完成,對照(C)線將以紅線顯示(顏色強(qiáng)度可能不同)。如果質(zhì)控(C)線不可見,則結(jié)果無效,應(yīng)使用新樣本和新的檢測試劑盒重復(fù)檢測。

如果TEST(T)線可見,則確認(rèn)痰液樣本中存在大于預(yù)設(shè)閾值的活性NE。

  1. 性能特征

使用58份冷凍痰液樣本評估NEATstik®檢測的性能。使用ProteaseTag®Active NE免疫測定法(ProAxsis Ltd)定量測定活性NE。

  • 42份樣本有痰液NE濃度

< 8µg/mL = 陰性

  • 16份樣本有痰液NE濃度

> 8µg/mL = 陽性

該檢測對16份NE定量高于8µg/mL的痰液樣本中的16份給出了陽性結(jié)果(100%靈敏度),對42份NE定量低于8µg/mL的痰液樣本中的36份給出了陰性結(jié)果(86%特異性)。

 

  1. 使用限制

僅用于稀釋痰液樣本

為獲得準(zhǔn)確結(jié)果,請遵循提供的說明

NEATstik®結(jié)果必須結(jié)合其他臨床和患者進(jìn)行評價

  1. 處置

痰液樣本和使用的檢測組分具有潛在生物危害性。根據(jù)當(dāng)?shù)嘏R床廢物指南適當(dāng)處置使用過的檢測試劑盒和痰液樣本。

 

  1. 參考文獻(xiàn)
  1. Pham,C.(2008)International Journal of Biochemistry&Cell Biology,40(6-7),1317-1333.
  2. Sandhaus,R.&Turino,G.(2013)COPD,10(S1):60-63.
  3. Sagel,S. et al(2012)American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine,186(9):857-865
  4. Mayer-Hamblett,N. et al(2007)美國呼吸與重癥醫(yī)學(xué)雜志,175:822-828
  5. Chalmers,J.D. et al(2016)American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine 195:1384–1393.


 

僅溶液-無痰液“結(jié)塊”。

醫(yī)療保健專業(yè)人員可獲得的數(shù)據(jù)。

NEATstik®不能定量痰液樣本中的活性NE。


 

 

  1. 定量活性中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶

  1. 將樣品應(yīng)用于NEATstik®上的橢圓形樣品端口。

 

  1. 讀取結(jié)果前,等待10 min(使用定時器)。

 

如果TEST(T)線不可見,痰液樣本中存在的任何活性NE均不超過預(yù)設(shè)閾值。

 

  1. 故障排除

未出現(xiàn)對照(C)線

試驗(yàn)無效。使用新套件重復(fù)。

 

  1. 警告和注意事項(xiàng)

請勿使用超過有效期的組件

請勿混合不同試劑盒批次的組分

本檢測僅供一次性使用。請勿重復(fù)使用

處理痰液樣本和進(jìn)行檢測時,應(yīng)穿戴合適的防護(hù)

 

  1. 儲存

在室溫下儲存試劑盒。

如果在推薦的儲存條件下,每個檢測試劑盒仍保存在原始包裝中,則可使用至標(biāo)簽上打印的失效日期。

從密封袋中取出后,應(yīng)立即使用NEATstik®側(cè)流試驗(yàn)。

NEATstik®樣本稀釋緩沖液應(yīng)在開瓶后立即使用。

 

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