mblbio TS-0010-1C說(shuō)明書(shū)

背景

T淋巴細(xì)胞在免疫系統(tǒng)中起著核心作用。通過(guò)檢測(cè)各種細(xì)胞表面來(lái)測(cè)量總T細(xì)胞和T細(xì)胞亞群計(jì)數(shù)

分子。CD8+抗原特異性T細(xì)胞的計(jì)數(shù)需要I類(lèi)MHC/肽復(fù)合物對(duì)T細(xì)胞受體（TCR）的同源識(shí)別。

這可以使用T-Select MHC I類(lèi)四聚體來(lái)實(shí)現(xiàn)，該四聚體由四個(gè)MHC I級(jí)分子組成與熒光蛋白綴合。因此，T-Select MHC四聚體測(cè)定允許對(duì)與特定MHC分子復(fù)合的給定肽特異性的總T細(xì)胞群進(jìn)行定量。此外，由于結(jié)合不依賴于功能途徑

群體包括與功能狀態(tài)無(wú)關(guān)的特異性CD8+T細(xì)胞。可以在全血或分離的淋巴細(xì)胞/單核細(xì)胞制劑中進(jìn)行測(cè)量。在一些頻率較低的情況下，可能需要進(jìn)行體外細(xì)胞擴(kuò)增。

染色是通過(guò)將樣品與T-Select MHC四聚體試劑孵育，然后洗去過(guò)量的四聚體來(lái)完成的。然后通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定四聚體陽(yáng)性淋巴細(xì)胞的數(shù)量。

該四聚體試劑包含人類(lèi)I類(lèi)HLA-A*02:01和來(lái)源于CMV pp65結(jié)構(gòu)蛋白的表位肽，并且它可以通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HLA-A*02:01限制性CMV pp65-特異性CD8+T細(xì)胞。

巨細(xì)胞病毒（CMV/HHV-5）是一種廣泛傳播的皰疹病毒，無(wú)癥狀感染大多數(shù)人。健康個(gè)體中的CMV特異性T細(xì)胞在控制CMV再激活中起著重要作用。然而，免疫功能受損個(gè)體的巨細(xì)胞病毒感染是感染發(fā)病率和死亡率的主要原因，尤其是在移植受者和感染人類(lèi)免疫缺陷病毒（HIV）的人群中。CMV特異性T細(xì)胞的再生與對(duì)CMV疾病的保護(hù)之間的相關(guān)性已在接受同種異體骨移植的患者中得到證實(shí)

骨髓移植（BMT）。供體來(lái)源的CMV特異性T細(xì)胞的過(guò)繼轉(zhuǎn)移導(dǎo)致BMT患者的病毒特異性免疫恢復(fù)，同時(shí)降低了病毒再激活率。使用MHC四聚體監(jiān)測(cè)CMV特異性T細(xì)胞可用于預(yù)測(cè)有復(fù)發(fā)或持續(xù)性CMV感染、CMV疾病或移植相關(guān)死亡率風(fēng)險(xiǎn)的患者。

HLA限制

HLA-A*02:01

CTL表位CMV pp65（495-503個(gè)氨基酸，NLVPMVATV）的起源和序列

試劑

500?L液體-10?L/測(cè)試

將四聚體溶解在水性緩沖液中

含有0.5mM EDTA、0.2%BSA、10mM Tris-HCl

（pH 8.0）、150mM NaCl和0.09%NaN3。

共軛物

TS-0010-1C

鏈霉親和素藻紅蛋白（SA-PE）

486-580 nm激發(fā)

發(fā)射波長(zhǎng)為586-590 nm

TS-0010-2C

鏈親和素-別藻藍(lán)蛋白（SA-APC）

633-635 nm激發(fā)

發(fā)射波長(zhǎng)為660-680 nm

儲(chǔ)存條件

儲(chǔ)存溫度為2至8°C。不要凍結(jié)。盡量減少曝光。小瓶標(biāo)簽上注明了有效期。

Code No.　TS-0010-1C